Détecter, quantifier et analyser l’ADN d’une cible biologique est un enjeu majeur dans de nombreux domaines des sciences du vivant. Pour réaliser ces tests, les instruments de PCR en temps réel, couplant amplification d’acides nucléiques in vitro et détection par fluorescence, sont connus pour être les plus rapides (< 1h), sensibles (détection de quelques exemplaires d’un virus dans un échantillon biologique complexe ou mise en évidence d’une mutation) et simples d’utilisation (une seule étape). Mais en raison de l’emploi d’un système de détection optique par fluorescence associé à l’utilisation de sondes fluorescentes, ces dispositifs analytiques souffrent d’un coût d’acquisition instrumental élevé ainsi que d’une maintenance et d’une utilisation onéreuse, et de par leur conception, sont difficilement transportables. Pour remédier à ces inconvénients, nous avons examiné la possibilité de remplacer la détection de fluorescence par une détection électrochimique. Pour un tel but, nous avons mis au point deux stratégies différentes que nous avons validées expérimentalement. Les résultats obtenus se comparent bien avec les méthodes de PCR en temps réel reposant sur l’utilisation de sondes fluorescentes intercalantes offrant ainsi des opportunités de développement industriel autant sur le marché de la recherche en science du vivant que sur le marché du diagnostic.
Les stratégies de détection mise en place, les défis technologiques que nous avons eu à résoudre, les performances analytiques obtenues en PCR en temps réel et avec les courbes de fusion pour le genotypage et l’étude de la stabilité thermique des protéines mais aussi les perspectives offertes comme l’intégration vers des laboratoires sur puce via l’utilisation de méthode d’amplification d’ADN isotherme seront présentés. L’adéquation nécessaire pour créer une start-up entre une nouveauté technologique et un marché commercial sera évoquée.
Pour plus d'information, consulter le site de l'ITAV.
Contact:Christelle HUREAU et Béatrice MESTRE
Les stratégies de détection mise en place, les défis technologiques que nous avons eu à résoudre, les performances analytiques obtenues en PCR en temps réel et avec les courbes de fusion pour le genotypage et l’étude de la stabilité thermique des protéines mais aussi les perspectives offertes comme l’intégration vers des laboratoires sur puce via l’utilisation de méthode d’amplification d’ADN isotherme seront présentés. L’adéquation nécessaire pour créer une start-up entre une nouveauté technologique et un marché commercial sera évoquée.
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